En la superficie externa de la membrana plasmática se aprecia una especie de cápsula, de naturaleza polisacárida. Mediante diversas pruebas químicas se revela ultraestructuralmente una capa compacta, compuesta por proteínas, entre la membrana plasmática y otra capa más externa, compuesta por carbohidratos. Estas proteínas confieren al micoplasma una porción hidrófoba mínima que favorece la adherencia a las células respiratorias mediante interacciones hidrofóbicas.

¬ Inmunoreacción granular a Mh libre en la luz bronquial y en la superficie del epitelio respiratorio. Técnica de SLAB, revelado AEC. 40X.

Es un organismo de difícil cultivo, su crecimiento es muy pobre y en el tracto respiratorio del cerdo puede encontrarse de forma habitual M. hyorhinis, microorganismo de fácil crecimiento y frente al que M. hyopneumoniae es muy mal competidor. El cultivo se realiza en medios complejos y por la razón antes expuesta se recomienda la adición de un antisuero frente a M. hyorhinis. En la actualidad, se emplea para su aislamiento el medio de Friis modificado, por la adición de 8,1 % de suero de cerdo para mejor adaptación del micoplasma al cultivo. Su primer aislamiento sólo se consigue en medios líquidos. En el medio líquido de Friis crece lentamente, entre 3 y 30 días de incubación. La rapidez de crecimiento es mayor si la incubación en medio líquido se realiza a 37° C, en anaerobiosis y agitación continua.

Normalmente el cultivo inicial se subcultiva en medio liquido varias veces hasta hacer el inoculo en agar sólido y se recomienda incubar en atmósfera con un 5-10% de dióxido de carbono. Las colonias, en medio sólido, se hacen visibles hacia los 2 días de incubación y alcanzan un tamaño de 0,5-1 mm de diámetro entre los 4 y 7 días. Estas colonias se visualizan mal a simple vista y están desprovistas de protuberancia central. Requiere para el crecimiento colesterol y fermenta la glucosa, pero no la arginina ni la urea. Para terminar de dificultar el aislamiento de M. hyopneumoniae se ha demostrado utilizando técnicas de inhibición del crecimiento y de biología molecular, que hay cepas heterogénas, lo que dificulta el aislamiento y la identificación en ocasiones.

Tiene similitudes antigénicas con M. flocculare, así como morfológicas y de cultivo, aunque este no es normalmente un patógeno reconocido del cerdo. Para diferenciarlos hay que efectuar pruebas serológicas, basadas en el estudio de antígenos específicos (proteína lactato deshidrogenasa 36 kDa, 40, 43, 64, 74 y 97 kDa) de M. hyopneumonaie.

El M. hyopneumonaie resiste 30 minutos a 45° C, pero a 50 °C se destruye en 5 minutos. Soporta la liofilización y temperaturas de -180° C. Desaparece del pelo y ropa en 48 horas en ambiente seco. Puede sobrevivir durante mucho tiempo en medio líquido idóneo, pero no cuando el cultivo se queda seco. No sobrevive a la desecación mas allá de una semana, aunque este en un medio favorable. Sobrevive bien en el agua de lluvia, hasta 17 días, a bajas temperaturas (2-7 ºC), lo que explicaría la transmisión aerógena por aire húmedo. La penicilina G ejerce un efecto inhibidor del crecimiento sobre M. hyopneumoniae - pese a carecer de pared bacteriana -, por ello, es sustituida en los medios de cultivo por bacitracina y meticilina.